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Borja TosarFrancis VillatoroHéctor SocasJosé EdelsteinMaría RibesGastón GiribetIsabel Corderocuantificación adn fluorescencia arnprotocolos calibración evitar contaminación muestrasartículo nature falta información técnicaARNADNFrancis Villatoro10 nanogramos
Protocolos calibración evitar contaminación muestras
Con
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Francis Villatoro explica que la cuantificación del ADN mediante fluorescencia en presencia de ARN es problemática y requiere protocolos específicos para evitar contaminaciones.
…utilizan fluorescencia; la fluorescencia no es adecuada para cuantificar la cantidad de ADN porque en fluorescencia también ves estructuras ligadas entre ARN, sobre todo en un cultivo con ARN. O sea, tú tienes una vacuna de ARN mensajero, o sea, tienes ARN. Y cuantificar el ADN con fluorescencia en presencia de ARN no es nada recomendable y requiere una serie de criterios de calibración; requiere una serie de protocolos para evitar contaminar las muestras, etcétera, que aparentemente no se han seguido, sobre todo porque cuando te lees el artículo te das cuenta de que aquí falta que digan que han hecho esto, porque no dicen que lo han hecho, ¿vale? Es un experto que rápidamente se da cuenta y ha sido muy criticado por eso. Y después utilizan una técnica que es la PCR. La PCR cuantitativa, ¿acordáis de las PCR que se habló en su momento?, que permitían cuantificar los niveles de virus en sangre, etc. Bueno, la PCR cuantitativa es más precisa que la fluorescencia, pero tiene…
Significado #1 · Palabras #1
Francis Villatoro explica que la cuantificación del ADN mediante fluorescencia en presencia de ARN es problemática y requiere protocolos específicos para evitar contaminaciones.
Habla: Francis VillatoroSignificado #1 · Palabras #1cuantificación adn fluorescencia arnprotocolos calibración evitar contaminación muestrasartículo nature falta información técnica…utilizan fluorescencia; la fluorescencia no es adecuada para cuantificar la cantidad de ADN porque en fluorescencia también ves estructuras ligadas entre ARN, sobre todo en un cultivo con ARN. O sea, tú tienes una vacuna de ARN mensajero, o sea, tienes ARN. Y cuantificar el ADN con fluorescencia en presencia de ARN no es nada recomendable y requiere una serie de criterios de calibración; requiere una serie de protocolos para evitar contaminar las muestras, etcétera, que aparentemente no se han seguido, sobre todo porque cuando te lees el artículo te das cuenta de que aquí falta que digan que han hecho esto, porque no dicen que lo han hecho, ¿vale? Es un experto que rápidamente se da cuenta y ha sido muy criticado por eso. Y después utilizan una técnica que es la PCR. La PCR cuantitativa, ¿acordáis de las PCR que se habló en su momento?, que permitían cuantificar los niveles de virus en sangre, etc. Bueno, la PCR cuantitativa es más precisa que la fluorescencia, pero tiene…
Francis Villatoro señala deficiencias en protocolos experimentales, incluyendo la falta de calibración y el uso de reactivos diferentes, lo que genera dudas sobre la validez de los resultados.
Habla: Francis VillatoroSignificado #2 · Palabras #2reactivos diferentes en protocoloscalibración de experimentos francis villatorogarantías contaminación muestras viales…del SV40 y lo han observado; es decir, sus resultados cuando tú los ves pues muestran unos niveles que están por encima de la banda de esos 10 nanogramos y bueno, se han alarmado, pero ¿qué pasa? Que cuando tú miras el protocolo, echas en falta muchas. Cosas, echas en falta calibración. Todos estos protocolos hay que calibrarlos; echas en falta que se utilicen reactivos diferentes. Aquí hay uno de los autores que dice: yo uso mis reactivos, yo he cedido mis reactivos, pero tú has hecho los experimentos. No dice nada, lo deja así como en el aire, como diciendo: bueno, alguien lo habrá hecho, pero el que lo has hecho sabe usarlo bien. ¿Hay garantías de que no haya contaminación en la manipulación de las muestras de ese contenido de los viales? No hay ningún tipo de garantía. Entonces, el resultado final es que desde el punto de vista metodológico este es un artículo extremadamente flojo y débil, que le pueden llover tortas por todos lados. Y les ha llovido en redes sociales; y les ha llovido muchas tortas por todos lados entonces…