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Ignacio CrespoJuan Carlos GilFrancis VillatoroJosé EdelsteinHéctor SocasSilvana TapiaIsabel CorderoLuisa AchaerandioGastón Giribetpartícula de adn en ratoneslinfocitos b producen señales 9bensayos in vivo con ratonesmodificaciones sobre la marchaconstructo atascado en células dendríticasratones inoculados con constructosistema inmunitario y avance del constructoantígeno sin llegada al destinolinfocitos BLuisa AchaerandioJosé Edelsteinandamios de ADNorigami de ADN
Ensayos in vivo con ratones
Ep545: 11F; Dinosaurios; Sag A*; Genes y Psiquiatría; AlphaGenome; ADN Origami
12 de febrero de 20264 momentos
Con
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Luisa Achaerandio describe los resultados obtenidos al probar una partícula de ADN en ratones, señalando problemas que surgieron durante los ensayos in vivo y cómo los investigadores tuvieron que realizar modificaciones.
…y lo más importante que son estables porque eso también y luego lo dicen en discusión el ADN es más inestable y hay más probabilidades que se degrade que las proteínas pero en principio ellos dicen que aquí en su trabajo eso no ha sido un factor importante. La partícula por tanto está bien construida y en cultivos celulares parece que también reaccionan bien los linfocitos B y empiezan a producir señales frente a ese 9B en vehículo, pero cuando lo pasan a los ensayos sin vivo en ratones es donde empiezan a tener problemas y luego tienen que ir haciendo modificaciones sobre la marcha, que eso claro te lo cuentan en el material y método y uno tiene que ir hilando otra vez la historia. Bueno, los resultados en el laboratorio pues parece ser que Al principio, con el primer prototipo que hicieron de constructo, no funcionó bien. En el cultivo celular sí, pero cuando llega a ensayarlo con los animales algo falla. Primero, bueno, resulta que ese constructo se queda depositado en las células dendríticas foliculares; es decir, como que es, por decirlo de alguna manera, se atasca. Como hemos dicho, los ratones se inoculan, tienen que llegar hasta el sistema inmunitario y llega un momento que, por lo que sea, eso no avanza. Entonces, si el antígeno no llega donde tiene que llegar, pues no tenemos una inmunostimulación correcta. Resulta, y ya un poco por ir más al grano, que esos andamios habían quedado atrapados y por tanto no llegaban a esas células dendríticas foliculares que tenían que llegar para estimular luego todo el proceso…
Significado #1 · Palabras #2
Luisa Achaerandio explica que, tras verificar la construcción del anticecrino mediante diversas técnicas como electroforesis, los investigadores realizaron ensayos in vitro en cultivos celulares de linfocitos B y posteriormente estudios en ratones para evaluar la respuesta inmunológica a la nueva estructura.
Habla: Luisa AchaerandioSignificado #6 · Palabras #3linfocitos b en cultivos celularesrespuesta inmunológica en ratonesinmunización subcutánea de ratonesfitometría de flujo linfocitos blinfocitos c implicados procesoproducción de anticuerpos ratonesmicroscopía ganglios linfáticosinmunofluorescencia análisis ratones…Luego le han metido ese antígeno, el del nombre de seis letras raro, y luego la han unido con una reacción que si no recuerdo mal en el artículo ponía una reacción click; que no sé en qué consiste, pero bueno, la han conseguido añadir al origami. Bueno, el anticecrino, como he dicho, tampoco es modificado y luego han verificado la construcción por varias técnicas. Se han hecho electroforensis, se han hecho muchas técnicas para ver que estaba bien hecho el constructo. luego ya pasando ya que lo tienen el prototipo pasan a ensayar primero in vitro en cultivos celulares de linfocitos B y ven cómo reaccionan esas células en cultivo a esa nueva estructura y posteriormente ya pasan a estudios en animales además en varios grupos de ratones a estos ratones se les inmuniza con una inyección subcutánea y bueno después se analiza como esos ratones en su sistema inmunológico Unitario ha reaccionado a esa estructura. A los ratones se hace también un montón de análisis desde fitometría de flujo para analizar los linfocitos B, los linfocitos C, que ya tenemos que también están implicados en el proceso, producción de anticuerpos, se hace también microscopía de los ganglios linfáticos, inmunofluorescencia, etc. Hacen muchos ensayos. para ir ya un poquito concretando cuáles son los resultados más novedosos que encuentran estos autores lo primero que resaltan y demuestran que pueden fabricar correctamente estos andamios de ADN que lo consiguen porque vieron que se desplegaron correctamente de hecho en el material suplementario se ven las figuras perfectamente que tienen la forma que ellos esperaban, únicos eicosahedro y que el antígeno está unido donde se tenía que unir y lo más…
Luisa Achaerandio describe los resultados obtenidos al probar una partícula de ADN en ratones, señalando problemas que surgieron durante los ensayos in vivo y cómo los investigadores tuvieron que realizar modificaciones.
Habla: Luisa AchaerandioSignificado #1 · Palabras #2partícula de adn en ratoneslinfocitos b producen señales 9bensayos in vivo con ratonesmodificaciones sobre la marchaconstructo atascado en células dendríticasratones inoculados con constructosistema inmunitario y avance del constructoantígeno sin llegada al destino…y lo más importante que son estables porque eso también y luego lo dicen en discusión el ADN es más inestable y hay más probabilidades que se degrade que las proteínas pero en principio ellos dicen que aquí en su trabajo eso no ha sido un factor importante. La partícula por tanto está bien construida y en cultivos celulares parece que también reaccionan bien los linfocitos B y empiezan a producir señales frente a ese 9B en vehículo, pero cuando lo pasan a los ensayos sin vivo en ratones es donde empiezan a tener problemas y luego tienen que ir haciendo modificaciones sobre la marcha, que eso claro te lo cuentan en el material y método y uno tiene que ir hilando otra vez la historia. Bueno, los resultados en el laboratorio pues parece ser que Al principio, con el primer prototipo que hicieron de constructo, no funcionó bien. En el cultivo celular sí, pero cuando llega a ensayarlo con los animales algo falla. Primero, bueno, resulta que ese constructo se queda depositado en las células dendríticas foliculares; es decir, como que es, por decirlo de alguna manera, se atasca. Como hemos dicho, los ratones se inoculan, tienen que llegar hasta el sistema inmunitario y llega un momento que, por lo que sea, eso no avanza. Entonces, si el antígeno no llega donde tiene que llegar, pues no tenemos una inmunostimulación correcta. Resulta, y ya un poco por ir más al grano, que esos andamios habían quedado atrapados y por tanto no llegaban a esas células dendríticas foliculares que tenían que llegar para estimular luego todo el proceso…
Luisa Achaerandio describe los resultados obtenidos en estudios realizados con ratones, donde se observa un incremento significativo en el número de células de un linaje específico de linfocitos B tras la aplicación del sistema.
Habla: Luisa AchaerandioSignificado #11células linfocitos b en ratonessistema incrementa células lifocitos borigami de adn versus andamiaje proteínas…los altamente inmunogénicos. Además, se hacen ensayos también porque dicen: "Vale, hemos conseguido activar este tipo celular, este linaje; bueno, tipo celular no, este linaje de linfocitos B que estábamos buscando". Pero ¿cuánto lo hemos conseguido activar? Se hacen estudios en ratón y por lo visto llegan a encontrar, pues estoy buscando el número exacto no sé si lo tengo por aquí, bueno, creo que no, pero en condiciones normales cuando no existe ese sistema solamente se encuentran 6 células de este linaje de lifocitos B por cada millón y después de utilizar este sistema eso incrementa absolutamente y ahí sí tienen una ventaja muchísimo mayor que cuando se utilizaba el andamiaje de proteínas aquí es cuando consiguen origami de ADN, un punto, andamiaje de proteínas, cero. Aquí es donde está el mayor cambio en cuanto a los distintos sistemas, y es que el portar el antígeno en ese vehículo de proteínas no solamente estimulaba el sistema inmunitario, se producían anticuerpos que no queríamos y enmascaraban a los que sí querían.…
Luisa Achaerandio y José Edelstein comentan sobre la especialización necesaria para llevar a cabo un proyecto científico complejo, ejemplificando con el diseño de estructuras y los ensayos en ratones.
Habla: Luisa AchaerandioPalabras #6diseño insílico de estructurasensayos en ratonesmicrobiología y citómetro de flujotécnicos especializados en equipos…el problema viene porque hay mil gajas, pero es que me parece muy chulo todo lo que nos has contado y claro, es que lo mismo hacía falta a un montón de gente para hacerlo Es que fíjate que cantidad de técnicas diferentes, eso es imposible para dominar Una persona es que el que ha hecho el diseño insílico de la estructura tiene un conocimiento totalmente diferente al que ha hecho el ensayo en ratones y dentro del ensayo en ratones y a nosotros nos pasa. Yo soy en microbiología pero yo no sé manejar el citómetro de flujo, yo llevo las muestras y se interpretan los datos pero yo no sé poner en marcha el aparato o no soy a lo mejor especialista en si falla algo exactamente, hay técnicos y hay personal especializado. Que se ha dedicado muchos años a estudiar eso, o esa técnica, o ese aparato, y entonces eso es lo bonito porque enriquece y amplía. Lo que pasa que, como en todo, al final los currículums se evalúan por el número de publicaciones, pues no deberían al peso,…